همسانه سازی سازه ی خاموشی ژن bbe و بهینه سازی القاء ریشه موئین در گیاه داروئی شقایق.

گیاه شقایق یکی از مهم ترین گیاهان صنعت دارویی میباشد. این گیاه گروه وسیعی از آلکالوئیدهای ایزوکوینولین را تولید می کند. آن به عنوان تنهاترین منبع تجدید پذیر برای مسکن های دارویی کدوئین و مورفین و همچنین شل کننده عضله پاپاورین و ضد میکروب نوسکاپین می باشد. یکی از تکنیک مورد استفاده جهت دستورزی گیاهان، خاموشی ژن با استفاده از rna تداخل گر می باشد.در این پژوهش با هدف بررسی تاثیر خاموش سازی ژن بربرین بریج انزایم (bbe) بر پروفایل آلکالوئیدهای مهم شبکه مورفینان از تکنیک rnai استفاده گردید.ژن مورد نظر در ناقل t/a کلون شده و توالی یابی شد. سپس قطعه مورد نظر توسط هضم از ناقل t/a جدا شده و در جهت سنس در ناقل pgsa1285 کلون گردیدپس از تایید حضور قطعه خاموشی در جهت سنس، مجدداَ ناقل pgsa1285 با آنزیم های برشی هضم شد و قطعه خاموشی در جهت آنتی سنس کلون گردید.یکی دیگر از تکنیک های افزایش آلکالوئید استفاده از کشت ریشه موئین حاصل شده از باکتری آگروباکتری رایزوژنز می باشد. جهت بهینه سازی تولید ریشه موئین، آزمایشی با فاکتورهایی شامل فاکتور محیط در دو سطح (b5 و b52/1)، فاکتور سویه باکتری در سه سطح (atcc15834، a4 و msu) و شرایط نوری در دو سطح (48 ساعت تاریکی کامل و 16 ساعت تاریکی/ 8 ساعت روشنایی) در زمان هم کشتی انجام شد.